Медицина 2.0

Хлорофиллипт . сложный органический препарат, относящийся к фармакотерапев-тической группе антисептических лекарственных средств. Особое внимание при контроле его качества , с нашей точки зрения, следует уделять показате-лям ²Антибактериальная активность⌡, ²Микробиологическая чистота⌡. Целью работы явилось разработка методики определения антимикробной активности препарата Хлорофиллипт раствор в масле 2% в связи с невоспроизводимостью метода определения антибактериальной активности препарата, представленного в ФС 42-1339-92. Объектами исследований были образцы Хлорофиллипта раствора 2% в масле, тест-культура Staphylococcus aureus АТСС 6538-Р. По ФС 42-1339-92 извлечение хлорофиллипта из готового препарата производят с помощью этилового спирта и хлороформа. Однако после такого извлечения метод серийных разведений в мясопептонном бульоне (МПБ) не позволяет визуально определить наличие или отсутствие роста из-за помутнения среды. Чтобы устранить невозможность учета результатов разработан метод серийных разведений в агаризованной питательной среде, на поверхность которой методом репликаций наносят взвесь тест-штамма. В соответствии с предложенной методикой антибактериальную активность препарата определяли, используя расплавленный питательный агар. Для этого 1,5 мл образца препарата помещали в стерильную колбу вместимостью 50 мл, добавляли 13,5 мл расплавленной среды ≤1 (температура 80-90о С) и быстро перемешивали. 10 мл полученного разведения 1:10 переносили в стеклянную колбу, добавляли 90 мл расплавленной среды ≤1 и перемешивали (разведение 1:100). Методом 2-х кратных разведений получали разведения 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600, перенося 30 мл каждого предыдущего разведения в колбу с 30 мл расплавленной среды. Полученные разведения переносили по 15 мл в 2 чашки Петри. В контрольные чашки вносили по 0,3 мл стерильного масла и 15 мл среды. После застывания среды чашки подсушивали в термостате в течение 30 мин и петлей методом репликаций наносили взвесь микроорганизма. Чашки инкубировали при температуре (32,5+2,5)оС в течение 24 ч. Отмечали рост культуры в контроле и в опыте. Разведение препарата, на котором отсутствовал рост тест-штамма харак-теризовало антибактериальную активность препарата. Препарат задерживал рост тест-штамма S.aureus по сравнению с контролем в разведении не менее чем 1:400, что соответствует концентрации хлорофиллипта 50 мкг/мл. Полученные результаты позволяют рекомендовать этот метод для включения в нормативную документацию.



автор: Гунар Ольга Викторовна



Соавторы:



Каграманова К.А., ФГУ НЦ ЭСМП Росздравнадзора, г.Москва

Иллюстрация к статье: Яндекс.Картинки